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分光光度計(jì)的基本原理
分光光度計(jì)的理論依據(jù)是建立在光的吸收定律上的。光的吸收定律又稱:朗伯-比爾定律。
就是利用物質(zhì)在光的照射激發(fā)下,具有選擇性吸收現(xiàn)象來對物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。
I0:入射的單色光強(qiáng)度
T =I/I0×100% I:出射的單色光強(qiáng)度
T:透射比強(qiáng)度(透光率),用百分?jǐn)?shù)表示。
朗伯-比耳定律:A=KCL A=log 1/T = -log T
A:吸光度 (吸收比強(qiáng)度)
K:吸光系數(shù)
C:樣品的濃度(g/l)
L:比色皿的寬度(cm)
吸光度:當(dāng)一束平行的單色光,垂直照射在均勻的被測樣品時(shí),該樣品就有一定的吸收,樣品對入射光減弱吸收的程度,稱為吸光度,通過儀器便可測出,吸光度是沒單位的一個量。從以上公式中可以看出,當(dāng)入射光強(qiáng)度一定時(shí),物質(zhì)的吸光度與物質(zhì)中吸光物質(zhì)的濃度和物質(zhì)厚度的乘積成正比。